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      • 白介素-6受體(可溶性)ELISA KIT?

      白介素-6受體(可溶性)ELISA KIT?
      產品簡介:

      白介素-6受體(可溶性)ELISA KIT?,運用雙抗夾心 ELISA 法,精準定量血清等樣本中可溶性受體,操作簡便,廣泛用于科研 。

      產品型號:

      更新時間:2025-07-04

      廠商性質:生產廠家

      訪 問 量 :2825

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      白介素-6受體(可溶性)ELISA KIT

      白介素-6受體(可溶性)ELISA KIT,專為定量檢測生物樣本里可溶性白介素 - 6 受體含量設計,在科研領域對免疫及炎癥研究意義重大。


      1. 檢測原理:基于雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法。酶聯板預先包被針對可溶性白介素 - 6 受體的特異性抗體。樣本加入后,其中的可溶性白介素 - 6 受體與固相抗體結合。隨后加入酶標記的抗可溶性白介素 - 6 受體抗體,形成 “固相抗體 - 可溶性白介素 - 6 受體 - 酶標抗體" 復合物。經洗滌去除未結合物,加入底物溶液(如 TMB),在酶催化下底物顯色,顏色深淺與樣本中該受體含量成正比。通過酶標儀在 450nm 波長測吸光度,與標準曲線對比得出樣本中可溶性白介素 - 6 受體濃度。

      2. 試劑盒組成

        • 酶聯板:有 96 孔或 48 孔規格,預包被抗體,為反應承載物。

        • 標準品:通常為凍干品,需用標準品稀釋液復溶并稀釋成系列濃度梯度,如 0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL,用于繪制標準曲線。

        • 樣本xi釋液:用于稀釋濃度過高的待測樣本,使樣本濃度適配試劑盒檢測范圍。

        • 酶標抗體:即 HRP 標記的抗可溶性白介素 - 6 受體抗體,為濃縮液,需用酶標抗體稀釋液按要求稀釋。

        • 酶標抗體稀釋液:專門用于稀釋酶標抗體。

        • 底物溶液:如 TMB 底物,與酶標抗體中的 HRP 反應產生顏色變化。

        • 洗滌液:一般為濃縮液,按比例用蒸餾水或去離子水稀釋后,用于洗滌酶聯板,去除未結合物質,降低背景干擾。

        • 終止液:多為強酸溶液(如硫酸),用于終止底物顯色反應,穩定反應液顏色以便讀數。

        • 封板膜:溫育時覆蓋酶聯板,防止液體蒸發和外界污染。

        • 使用說明書:詳細介紹使用方法、注意事項、性能指標等。

      3. 樣本要求

        • 血清:采集血液后,室溫放置 2 小時或 4℃過夜,1000×g 離心 20 分鐘取上清,采血需用無熱原、無內毒素一次性器材。

        • 血漿:可用 EDTA、肝素等抗凝,樣本采集后 30 分鐘內,2 - 8℃下 1000×g 離心 15 分鐘取上清。

        • 細胞培養上清:1000×g 離心 20 分鐘,去除細胞碎片和雜質后取上清檢測。

        • 組織勻漿:用預冷 PBS(0.01M,pH = 7.4)沖洗組織,去除殘留血液,剪碎組織后按 1:9(w/v)加 PBS,冰上充分研磨,5000×g 離心 5 - 10 分鐘取上清。

        • 樣本采集后若短期內檢測,可 4℃保存;長期保存需 - 20℃或 - 80℃凍存,且避免反復凍融,溶血樣本一般不適合檢測。

      4. 操作流程

        • 準備工作:從冰箱取出試劑盒,平衡至室溫(約 30 分鐘),稀釋濃縮洗滌液。

        • 加樣:設空白孔、標準品孔和樣本孔。空白孔加樣本xi釋液,標準品孔加不同濃度標準品,樣本孔加處理好的樣本,每孔加樣量通常 100μL,輕輕混勻,37℃溫育 90 分鐘。

        • 洗滌:棄去孔內液體,用洗滌液加滿各孔,浸泡 1 - 2 分鐘后甩干,重復洗滌 5 次,確保洗凈未結合物質。

        • 加酶標抗體:每孔加 100μL 稀釋好的酶標抗體工作液,37℃溫育 60 分鐘。

        • 再次洗滌:重復上述洗滌步驟。

        • 顯色:每孔加 90μL 底物溶液,輕輕混勻,37℃避光顯色 15 - 30 分鐘(依實際顯色情況判斷)。

        • 終止反應:每孔加 50μL 終止液,溶液顏色由藍色變為黃色。

        • 讀數:加終止液后 15 分鐘內,用酶標儀在 450nm 波長測各孔吸光度(OD 值)。

        • 計算結果:以標準品濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標繪制標準曲線。根據樣本 OD 值從標準曲線查出對應濃度,若樣本稀釋過,需乘以相應稀釋倍數得實際濃度。

      5. 性能指標

        • 檢測范圍:常見為 15.6 - 1000 pg/mL 等區間,滿足多種樣本檢測需求。

        • 靈敏度:可低至 7.8 pg/mL 甚至更低,能檢測微量的可溶性白介素 - 6 受體。

        • 特異性:對該受體高度特異,與其他細胞因子受體等幾乎無交叉反應。

        • 重復性:板內變異系數一般小于 10%,板間變異系數小于 15%,保障檢測結果穩定可靠。

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