人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1試劑盒
人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1試劑盒(Human Eotaxin1 Kit,Eotaxin1 Kit),又稱(chēng)人嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子1試劑盒,是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的體外診斷/科研檢測(cè)試劑盒,可特異性檢測(cè)人血清、血漿、支氣管肺泡灌洗液及組織勻漿中人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1的含量,經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測(cè)試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn),無(wú)交叉反應(yīng),檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無(wú)試劑降解、雜菌污染等問(wèn)題。嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1)是C-C趨化因子家族成員,核心功能是特異性趨化嗜酸性粒細(xì)胞向炎癥部位募集、活化,參與過(guò)敏性炎癥、寄生蟲(chóng)感染及自身免疫性炎癥的調(diào)控,其異常高表達(dá)與哮喘、過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性皮炎、慢性阻塞性肺疾病及寄生蟲(chóng)感染密切相關(guān),是評(píng)估嗜酸性粒細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)強(qiáng)度、相關(guān)疾病輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)及抗炎/抗過(guò)敏藥物篩選的重要指標(biāo)。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測(cè)快速,可精準(zhǔn)定量樣本中Eotaxin1含量,廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)、呼吸內(nèi)科科研、變tai反應(yīng)學(xué)檢測(cè)、抗炎藥物篩選等領(lǐng)域,是臨床、科研領(lǐng)域的核心炎癥趨化相關(guān)檢測(cè)工具。
檢測(cè)原理
本試劑盒的核心檢測(cè)原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),聚焦人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合炎癥趨化相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì):試劑盒預(yù)先將Eotaxin1特異性抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測(cè)樣本(血清、血漿等)后,樣本中的Eotaxin1會(huì)與酶標(biāo)板上的抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、炎癥細(xì)胞碎片、其他C-C趨化因子(如Eotaxin2)及無(wú)關(guān)蛋白后,加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的Eotaxin1二抗,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“包被抗體-Eotaxin1-酶標(biāo)二抗"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中Eotaxin1的含量呈正相關(guān),通過(guò)酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中Eotaxin1的具體含量。檢測(cè)流程規(guī)范:樣本采集后需及時(shí)處理(血清/血漿離心分離、支氣管肺泡灌洗液收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說(shuō)明書(shū)稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對(duì)照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,計(jì)算檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對(duì)人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1檢測(cè)需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:1. 特異性強(qiáng):采用高特異性Eotaxin1單克隆抗體,可特異性結(jié)合樣本中的Eotaxin1,不與Eotaxin2、Eotaxin3等其他趨化因子及雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),檢測(cè)特異性>99%,確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避炎癥趨化相關(guān)檢測(cè)中的干擾因素;2. 質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過(guò)靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測(cè),附完整QC報(bào)告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.1ng/mL,符合臨床檢測(cè)與科研標(biāo)準(zhǔn);3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測(cè)試劑(包被酶標(biāo)板、Eotaxin1標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無(wú)需額外配制核心試劑,步驟簡(jiǎn)單,全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成,適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室操作,新手易上手;4. 樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、支氣管肺泡灌洗液、組織勻漿四種核心樣本類(lèi)型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無(wú)需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡(jiǎn)單離心、稀釋即可檢測(cè),適配過(guò)敏性疾病、呼吸系統(tǒng)炎癥等相關(guān)科研與臨床多場(chǎng)景樣本;5. 適配場(chǎng)景廣:可用于哮喘、過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性皮炎等過(guò)敏性疾病,慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性粒細(xì)胞性肺炎等呼吸系統(tǒng)炎癥,寄生蟲(chóng)感染的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),嗜酸性粒細(xì)胞趨化機(jī)制研究,抗炎、抗過(guò)敏藥物篩選,以及臨床檢驗(yàn)、呼吸內(nèi)科、變tai反應(yīng)科、分子生物學(xué)科研實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。
四、適用樣本類(lèi)型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測(cè)與科研實(shí)驗(yàn),適用樣本類(lèi)型明確:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人支氣管肺泡灌洗液樣本(無(wú)菌采集后離心,去除細(xì)胞雜質(zhì))、人組織勻漿樣本(肺組織、鼻黏膜組織、皮膚組織、炎癥組織等破碎后離心取上清);實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景涵蓋哮喘、過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性皮炎等過(guò)敏性疾病,慢性阻塞性肺疾病、嗜酸性粒細(xì)胞性肺炎等呼吸系統(tǒng)炎癥,寄生蟲(chóng)感染的輔助診斷與療效監(jiān)測(cè),嗜酸性粒細(xì)胞趨化與Eotaxin1調(diào)控機(jī)制研究,抗炎、抗過(guò)敏藥物篩選與效果評(píng)估,以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)。推薦檢測(cè)體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀(波長(zhǎng)450nm),按照說(shuō)明書(shū)步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿、支氣管肺泡灌洗液可根據(jù)濃度適當(dāng)調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間為0.2~1.2ng/mL(具體以說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn))。(具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失;2. 標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開(kāi)封后,密封冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)用完,Eotaxin1標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞,底物液需避光保存;3. 樣本采集后及時(shí)處理,血清/血漿、支氣管肺泡灌洗液冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè),避免樣本變質(zhì)、Eotaxin1降解;4. 操作時(shí)嚴(yán)格遵循無(wú)菌規(guī)范,佩戴防護(hù)用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測(cè)過(guò)程中控制孵育溫度與時(shí)間,洗滌充分,避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差;5. 底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時(shí)需謹(jǐn)慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測(cè)完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板;6. 支氣管肺泡灌洗液、鼻黏膜組織等樣本需無(wú)菌采集,充分破碎離心去除組織碎片及細(xì)胞雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測(cè),避免雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果;血清/血漿樣本需避免溶血,溶血會(huì)影響Eotaxin1檢測(cè)準(zhǔn)確性。
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